紫外可見分光光度計是一類很重要的分析儀器,無論在物理學、化學、生物學、醫學、材料學、環境科學等科學研究領域,還是在化工、醫藥、環境檢測、冶金等現代生產與管理部門,紫外可見分光光度計都有廣泛而重要的應用。
紫外可見分光光度計工作條件的選擇
(1)測量波長
在定量分析中,為了提高測定的靈敏度,入射光的波長應選擇被測物的較大吸收波長λmax,如果λmax有干擾,可選擇另一條靈敏度稍低、但能避免干擾的譜線,所以,適當選擇入射光的波長,不僅能提高測定的靈敏度,還能提高測定的準確度。
(2)狹縫寬度
狹縫寬度過大,入射光的單色性差;狹縫寬度太小,入射光的強減弱。狹縫寬度過大或過小均會造成靈敏度降低,選擇是產生較小誤差情下的較大狹縫。一般選用儀器的狹縫寬琶度應小于待測樣品吸收帶的半寬度,否則測得的吸光度值會偏低,狹縫寬度的選擇應以減少狹縫寬度時供試品的吸光度不再;加為準,對于大部分被測品種,可以使用2nm縫寬。
(3)控制適當的吸光度范圍
可通過控制被測物濃度或改變吸收池厚度來實現吸光度合理的范圍,以盡量減小測量誤差。一般吸光度盡量控制在0.1-0.8范圍。
(4)空白溶液的選擇
空白溶液是用來調節吸光度測量工作零點即A=0,T=的溶液,以消除溶液中其它基體組分以及吸收池和溶劑對入射光的反射和吸收所帶來的誤差。根據情況不同,常用空白溶液有如下幾種選擇。
①溶劑空白 當溶液中只有待測組分在測定波長下有吸收,而其它組分無吸收時,可用純溶劑作空白。
②試劑空白 如果顯色劑或其它試劑有吸收,而待測試樣溶液無吸收,則用不加待測組分的其它試劑作空白。
③試樣空白 如果試樣基體有吸收,而顯色劑或其它試劑無吸收,則用不加顯色劑的試樣溶液作空白。